◆何谓脂筏
脂筏(Lipid Raft)是由胆固醇(cholesterol)和鞘磷脂(sphingomyelin),GPI锚定蛋白(GPI anchor protein)和棕榈酰化(palmitoylation)蛋白质组成的细胞膜构造,被认为是整合各种功能蛋白的功能域。
代表性例子:
√神经突触
√免疫突触
◆ULTRARIPA® Kit的应用
✔2种提取缓冲液,可浓缩、溶解脂筏;
✔蛋白质变性作用小,可稳定提取
✔只需添加缓冲液&离心,操作简单
应用实验
从神经组织膜组分分析神经突触相关蛋白的可融化和复合体
使用样品
小鼠脑组织(海马+大脑皮质)来源的P2膜组分
提取方法
1. 直接在各缓冲液中增溶P2膜组分
2. 在各不溶性组分中添加2%SDS进行增溶
数据提供
学习院大学理学部神经生物学研究室 高岛教授 住岡助教
结果
直接在样品中添加B缓冲液,与添加1% Triton X-100或RAPI相比,增溶效果更佳。
神经突触复合体分析(免疫沉淀)
用B-buffer可溶性组分进行免疫沉淀实验
✔可特异性检测生理性蛋白复合体
✔可用于RIPA不溶性组分的复合体分析
◆操作方法概要
30 min内,可简单浓缩、增溶脂筏蛋白
1. 用A-buffer(RIPA)增溶样品(细胞、组织等)
2. 离心(>10,000×g,5 min),回收A-buffer不溶性组分
3. 在A-buffer不溶性中添加B-buffer
4. 离心(>10,000×g,5 min)后回收可溶性组分
5. 用于各种应用实验中
◆产品特点
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 组成 | 包装 |
F015 |
UltraRIPA kit for Lipid RaftUltraRIPA 脂筏提取缓冲液套装 |
①A-buffer(RIPA)100 mL ②B-buffer 10mL |
1Kit |