MagCapture™ HP抗PA tag抗体磁珠
PA tag系统是在日本开发并使用的利用多肽标签(12个氨基酸残基)与大鼠单克隆抗体(NZ-1)结合的亲和纯化标签系统1)。NZ-1对PA tag具有高亲和性和特异性,通过免疫沉淀可一步纯化出高纯度的PA tag融合蛋白2)。它还可以应用于蛋白印迹,流式细胞术,免疫细胞染色,利用PA tag洗涤溶液,可以简单地回收使用过的磁珠1,3)。近年来,通过解析PA tag和NZ-1复合物的晶体结构,明确了PA tag标记β-转角的方法4)。利用该特点还发表了《将PA tag插入膜蛋白环区中的应用》的应用文章4)。
这一次,Wako推出了抗PA tag抗体固相化的磁珠。可用于免疫沉淀法中PA tag融合蛋白的纯化和检测。
◆特点
● 非特异性结合少
● 可对PA tag进行竞争性洗脱、酸洗脱或2mol/L MgCl2溶液洗脱
● 无需离心
● 可回收利用
◆数据
重组PA tag融合EGFP蛋白的回收实验
确认了对K562细胞裂解液中表达的PA tag融合EGFP蛋白的回收性能。结果表明,可在各种洗脱条件下纯化得到高纯度的重组PA tag融合EGFP蛋白。
抗PA tag抗体磁珠的回收实验
确认了抗PA tag抗体磁珠可再回收性能。结果表明,即使回收使用三次,也不会降低回收性能,可提取到重组PA tagg融合EGFP蛋白。另外,回收使用了PA tag Washing Solution[产品编号:169-27261]。
PA tag肽竞争性洗脱次数的研讨实验
研讨了是否能通过多次重复竞争性洗脱,提高回收量。结果表明,通过多次重复PA tag的竞争性洗脱,可以提高重组PA tag融合EGFP蛋白的回收量。
◆参考文献
1)Fujii,Y. et al. : Protein Expr. Purif., 95, 240(2014).
2)藤井勇樹 他 : 蛋白質科学会アーカイブ, 7, e 075(2014).
3)Kaneko,M. K. et al. :Biochem. Biophys. Res. Commun.,432, 40(2013).
4)Fujii,Y. et al. : J. Cell Sci., 129, 1512(2016).
◆产品列表
产品编号 |
产品名称 |
规格 |
包装 |
MagCapture™ HP Anti PA tag Antibody Magnetic Beads |
免疫化学用 |
2mL |
※ 仅供实验使用,不可用于临床诊断。