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Wako 011-20171 Azoxymethane 氧化偶氮甲烷–肠癌模型动物诱导剂

背景描述：

对于生命医学研究中，为了研究疾病的发病机理、环境刺激下疾病的发展过程，药物治疗追踪，或术后复发可能性示踪。或为了从庞大的化合物或单克隆抗体库中筛选到有潜力的治疗药物；或者对新疗法的疗效和风险评估。都离不开相应疾病动物模型的建立，所有研究都必须有动物模拟病症下大量可行数据的支撑，才能往下进行临床实验。

让我们开启动物造模的篇章，寻找适合你的”点“。

结肠癌造模诱导剂（Wako/Sigma）

偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

基本描述：

偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，缩写AOM，可有效诱导大小鼠结肠癌，广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤，从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外，越来越多结肠癌病例的发生，使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg体重）进入大鼠体内，连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。

作用机制：偶氮甲烷（AOM）能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物，导致G→A转化。

主要应用：偶氮甲烷（AOM）常联合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射动物，建立结肠癌模型，用来研究癌症发展机制和化学预防。

基本特征：

1）  CAS NO. 25843-45-2

2）  线性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3）  分子量：74.08

4）  纯度：≥98%

5）  结构式：

结肠癌（Colon cancer）模型建立案例：

1、  文献来源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1    DSS溶液制备（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中，使用前溶液保存在4℃，最好现配现用。

1.2    AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

1.3    小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法【详见懋康官网：www.maokangbio.com】

2、文献来源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制备（2.5% DSS溶液）：称取2.5g DSS溶于100ml无菌水，本溶液置于4℃可稳定保存1周。最好现配现用。

2.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液，且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

2.3 小鼠结肠癌造模方法

1）第1天称重，等数分组并标记小鼠；

2）按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量，取适量的AOM储存液（10mg/ml）用无菌生理盐水1:10倍稀释。

3）腹腔注射AOM工作液（剂量10mg/kg体重，则10g体重小鼠注射100ul工作液）到实验组小鼠，同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。

4）自此步之后，按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型，见方案A；若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型，见方案B。

方案A，自发性肿瘤进展模型

A1，第8天重复步骤1）-3）；

A2，第15天重复步骤1）-3）；

A3，第22天重复步骤1）-3）；

A4，第29天重复步骤1）-3）；

A5，第36天重复步骤1）-3）；【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】

A6，第一次注射后的3个月评估癌前病变，此时不需处死动物。

A7，第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。

方案B，慢性炎症驱动的肿瘤进展（Chronic inflammation-driven tumor progression）

B1，制备2.5%（wt/v）DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。

B2，按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

B3，第4天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B4，第6天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B5，第8天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满灭菌水。

B6，第22-29日重复步骤B1）-B5）。

B7，第40日评估癌前病变，此时不需处死动物。

B8，第53-60日重复步骤B1）-B5）。

B9，第80日评估肿瘤发展。

2.4 AOM诱导肿瘤图示（图1）

图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a）还能用于纵向研究；b）对于肿瘤负荷分析，每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。

Azoxymethane（AOM）订购信息：原装正品，欢迎来电咨询

DSS（Mw：36000-50000 Da）订购信息：

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

造模疾病名称   产品编号       品名       规格       包装

精神分裂症模型  136-16303 Methylazoxymethanol Acetate  20mg

大肠炎  194-14921 Sodium Dextran Sulfate 36,000 ～ 50,000         –      10g

皮肤肿瘤   147-03421   4-Nitroquinoline 1-Oxide       1g

膀胱炎  160-05191 Protamine Sulfate, from Salmon 1g

Wako   011-20171 Azoxymethane 25843-45-2 AOM大肠癌疾病造模试剂

帕金森病  136-16381 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine Hydrochloride（MPTP）10mg

大肠肿瘤 011-20171    Azoxymethane   100mg

乳腺肿瘤  042-02801  7,12-Dimethylbenz(α)anthracene  1g

肺肿瘤   147-03421  4-Nitroquinoline 1-Oxide  1g

糖尿病  191-15151 Streptozotocin  100mg

Wako结肠癌造模诱导结肠癌造模诱导剂-偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

结肠癌造模诱导剂（Wako/Sigma）

偶氮甲烷（Azoxymethane，AOM）

基本描述：

偶氮甲烷（氧化偶氮甲烷），英文Azoxymethane，缩写AOM，可有效诱导大小鼠结肠癌，广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤，从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外，越来越多结肠癌病例的发生，使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM（15mg/kg体重）进入大鼠体内，连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。

作用机制：偶氮甲烷（AOM）能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物，导致G→A转化。

主要应用：偶氮甲烷（AOM）常联合DSS（Mw：36000-50000 Da）注射动物，建立结肠癌模型，用来研究癌症发展机制和化学预防。

基本特征：

1）  CAS NO. 25843-45-2

2）  线性分子式：CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3）  分子量：74.08

4）  纯度：≥98%

5）  结构式：

结肠癌（Colon cancer）模型建立案例：

1、  文献来源：Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1    DSS溶液制备（2% DSS溶液）：溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中，使用前溶液保存在4℃，最好现配现用。

1.2    AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

1.3    小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法

1）  第1天称重和标记小鼠；

2）  按10 mg/kg体重的剂量腹腔注射AOM溶液；

3）  加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天加量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

4）  第3天清空笼子内剩余的DSS饮用水，过两天重新装满DSS溶液；

5）  第5天清空笼子内剩余的DSS饮用水，重新装满DSS溶液；

6）  第8天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续14天；

7）  第22-26天重复第3）-5）步；

8）  第29天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水持续14天；

9）  第43-47天重复第3）-5）步；

10）第50天清空笼子内剩余的DSS溶液，换上不含DSS的无菌水；

2、文献来源：Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制备（2.5% DSS溶液）：称取2.5g DSS溶于100ml无菌水，本溶液置于4℃可稳定保存1周。最好现配现用。

2.2 AOM溶液制备：用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液，且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

2.3 小鼠结肠癌造模方法

1）第1天称重，等数分组并标记小鼠；

2）按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量，取适量的AOM储存液（10mg/ml）用无菌生理盐水1:10倍稀释。

3）腹腔注射AOM工作液（剂量10mg/kg体重，则10g体重小鼠注射100ul工作液）到实验组小鼠，同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。

4）自此步之后，按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型，见方案A；若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型，见方案B。

方案A，自发性肿瘤进展模型

A1，第8天重复步骤1）-3）；

A2，第15天重复步骤1）-3）；

A3，第22天重复步骤1）-3）；

A4，第29天重复步骤1）-3）；

A5，第36天重复步骤1）-3）；【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】

A6，第一次注射后的3个月评估癌前病变，此时不需处死动物。

A7，第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。

方案B，慢性炎症驱动的肿瘤进展（Chronic inflammation-driven tumor progression）

B1，制备2.5%（wt/v）DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。

B2，按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽，以5ml DSS溶液/小鼠/天用量，对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水；

B3，第4天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B4，第6天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B5，第8天清空饮水槽内残留DSS溶液，并且重新灌满灭菌水。

B6，第22-29日重复步骤B1）-B5）。

B7，第40日评估癌前病变，此时不需处死动物。

B8，第53-60日重复步骤B1）-B5）。

B9，第80日评估肿瘤发展。

2.4 AOM诱导肿瘤图示（图1）

图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a）还能用于纵向研究；b）对于肿瘤负荷分析，每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。

Azoxymethane（AOM）订购信息：原装正品，欢迎来电咨询，021-54736159,18121428569。

DSS（Mw：36000-50000 Da）

动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂，以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制，推动医药学的发展来之缓慢，临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性，而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究，可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素，以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究，有助于更方便，更有效地认识人类疾病的发生发展规律，研究防治措施。

表面湿润张力测试混合溶液【表面张力测试液】Wetting Tension Test Mixture
用途：用于表面润湿张力测试
外观：蓝色液体
危险
保存：避光

润湿是液体通过膜表面扩张的一种现象。表征湿润程度的系数称为张力。对于用于塑料薄膜的油漆或涂料，或塑料薄膜的粘合剂而言这点很必要，塑料薄膜能够附着油墨、涂料和粘合剂。润湿张力用来度量这种附着能力。

（图1）在水一样表面张力强的液体里，要浸润表面，需要薄膜表面有亲水性（极性高）。

涂装、涂层、粘合塑料薄膜时，要求薄膜上的油墨、涂层剂、粘合剂能浸润薄膜，其浸润程度用表面润湿张力作标尺。薄膜表面有水珠时，不能说是被浸润。反之，像有机溶剂一样表面张力弱的溶剂，就算薄膜表面会弹水也一样可以浸润。 因此，涂装、涂层、粘合塑料薄膜时，需要知道塑料薄膜的润湿张力。

JIS K6768中已明确了润湿张力的检测方法。为了和ISO国际标准相匹配，该检测方法已经根据ISO 8296进行了彻底的修订。在修订版中，增加了多种测试用的液体混合物，应用范围也从聚乙烯和聚丙烯拓展到常规的塑料薄膜和片材。

根据日本工业标准K6768修订版，16种新型的润湿张力测试标准溶液，润湿系数从22.6到30.0以及从56.0到73.0，加入到传统的润湿系数标准溶液体系中。产品已经更新，妙博生物能够为您提供36种混合液，用于表面润湿张力测试。

（注）由于使用了质量更稳定的着色剂，色调与传统产品略有差异。但对于使用无害。

表面湿润张力的定义
按编号顺次在塑料薄膜上涂上一系列表面湿润张力不同的混合液，使其恰好湿润薄膜，由此判定混合液表面湿润张力（μN/cm）{dyn/cm2}的数值。 单位mN/m表示这种表面湿润张力的数值，即试剂名所标记的No．。例如NO.31的表面湿润张力是31mN/m (310μN/cm)* dyn/cm=1mN/m (=10μN/cm) （SI单位的统一）

（图2）

表面润湿张力的简便的试验方法
■ 用含有试剂的棉棒在试验材料（薄膜）上横向涂抹一次，请注意涂上的混合液的量会极大影响试验的正确度。

○涂抹量过多
液膜没有从内部破裂，液滴四周收缩形成水珠。（检测值会变大）

○涂抹量刚好
涂抹的液膜四周相中间都破裂。

○涂抹量过少
涂抹时液膜中断，出现涂抹不均匀现象。（检测值会变小）

■ 涂上试剂后2秒，判定液膜中央部分的状态。当液膜没有产生破裂时，判定为“可润湿”，如图(2)所示 ；产生破裂时，判定为“不可润湿”。

表面湿润张力测试混合液 Wetting Tension Test Mixture ( 36种 )，用于表面润湿张力测试。

Wako 赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase

Lysyl Endopeptidase, originally isolated from the soil bacterium discovered by Masaki, et al. cleaves specifically the peptide bonds at the carboxy-terminal side of Lysine residues and S-aminoethylcysteine residues with a high degree of specificity, making it a valuable tool for protein sequence analysis and for enzymatic synthesis of Lys-X compounds. An added feature of Lysyl Endopeptidase is its ability to retain complete activity after incubation in 4M urea or in 0.1% SDS solution for up to 6 hours at 30 degrees C.
Appearance: Lyophilized form containing ca. 10% Tris-HCl buffer, pH 8.

Activity: Shown on each label

Molecular Weight: 27,000 (gel filtration); 30,000 (SDS electrophoresis)

Solubility: Soluble in water or buffer solution.

Stability: Stable at 4 degrees C, when dissolved in buffer of pH 5~12. Stable at 30 degrees C in the range of pH 6~11, but unstable at 50 degrees C or higher.

Optimal pH: 9.0 -9.5 (Amidase activity)

Isoelectric point: 6.9~7.0

Substrate specificity:
Hydrolysable substrate … Tos-Lys-Ome, Bz-Lys-NH₂, Bz-Lys-pNA, Lys-pNA
Unhydrolysable substrate … Bz-Arg-NH₂, Bz-Arg-pNa, Arg-pNA

Inhibitors: DFP, PMSF, TLCK

Unit definition: One amidase unit (AU) is the amount of enzyme, which will produce 1 micromole of p-Nitroaniline per minute at 30 degrees C, pH 9.5.
Source: Bacteria 
Originally, the source of this product was indicated as “Achromobacter lyticus” based on the physiological and morphological properties of the bacteria. However, we confirmed that the 16SrDNA sequence was highly homologous to that of Lysobacter.