与常规的非变性细胞裂解缓冲液（RIPA buffer，1% Triton X-100等）相比，这款缓冲液套装（Buffer Kit）能迅速且高效地提取增溶相对困难的脂筏（Lipid Raft）蛋白质。从常规缓冲液中不可溶而丢弃的膜组分中，在维持蛋白质功能的情况下能实现高效地提取，有利于对脂筏等蛋白质的功能分析。
※ 本产品仅限于研究用。不可用于临床治疗。
◆细胞膜上的不溶性成分——脂筏（Lipid Raft）
裂解细胞进行蛋白质功能分析的时候，经常会使用RIPA（Radio-Immuno Precipitation Assay）缓冲液和1% Triton X-100缓冲液等的相对温和的细胞膜裂解缓冲液。这些缓冲液对蛋白质的构造和功能的影响小，适用于酶活性试验、免疫沉降和各种结合实验等蛋白质的功能分析。另一方面，与具有很强的蛋白质变性作用的SDS缓冲液相比，增溶能力较弱，完全不能溶解以脂筏（Lipid Raft）为主的细胞膜组分。许多表面活性剂都不能溶解脂筏，故其又被称为Detergent Resistant Membrane（DRM）。DRM中所含蛋白质的功能分析被认为是十分困难的。
脂筏（Lipid Raft）是由胆固醇（cholesterol）和鞘磷脂（sphingomyelin），GPI锚定蛋白（GPI anchor protein）和棕榈酰化（palmitoylation）蛋白质组成的细胞膜构造，被认为是整合各种功能蛋白的功能域。神经细胞突触和免疫细胞的免疫突触是脂筏的代表性例子。
脂筏示意图
◆特点
● 操作简单，能快速提取脂筏蛋白
● 使用两种类型的缓冲液（A buffer，B buffer）进行两个阶段的提取。先提取出胞浆蛋白和非脂筏蛋白，然后提取脂筏蛋白
● Buffer提取的任何蛋白质都不会失活
● A buffer和一般的RIPA buffer成分相同*。B buffer含有表面活性剂，可以通过透析除去
● 适用于哺乳动物细胞/组织
● 使用本品配制的溶解液适用于酶活性试验、免疫沉淀（Immunoprecipitation）、蛋白定量（BCA法）、SDS-PAGE和Western blot等
*1％ NP-40 Alternative，0.1％ SDS，50 mMTris-HCl (pH8.0)，150 mMNaCl，0.5％ Sodium Deoxycholate
◆缓冲液套装组成
● A buffer（RIPA buffer）（100 mL）
● B buffer（10 mL）
◆应用实例
从脂筏中提取总蛋白
用UltraRIPA kit A buffer溶解小鼠全脑组织后，回收A buffer不溶性组分（RIPA-insoluble fraction），添加2% SDS，RIPA buffer和UltraRIPA kit B buffer进行提取。提取后的总蛋白用SDS-PAGE/银染色检测（左），用BCA法定量蛋白质（右）。相对于具有很强的蛋白质变性作用的2% SDS 缓冲液，UltraRIPA kit 能够提取70%以上的蛋白质。
※不能保证全部蛋白质的可溶性都得到改善。
脂筏标记蛋白的提取
用UltraRIPA kit A buffer溶解小鼠全脑组织后，回收A buffer不溶性组分（RIPA-insoluble fraction），添加2% SDS，RIPA buffer和UltraRIPA kit B buffer，提取后进行SDS-PAGE。利用对应脂筏标记蛋白的抗体进行Western blot检测。
脂筏标记蛋白的免疫沉淀
用UltraRIPA kit A buffer溶解小鼠全脑组织后，回收A buffer不溶性组分，通过B buffer提取脂筏标记蛋白。对buffer提取物使用脂筏标记蛋白PSD95的抗体和Ｇ蛋白偶联磁珠进行免疫沉淀。使用银染色和抗PSD95抗体通过Western blot检测进行确认。
提取的蛋白质的酶活性测定
用1% Triton X100，RIPA buffer，UltraRIPA kit B buffer和2% SDS溶解CHO细胞，测定溶解物中乳酸脱氢酶（LDH）的活性。2% SDS具有很强的蛋白质变性作用，在几乎完全失活的情况下，1% Triton X100，UltraRIPA kit A buffer，和UltraRIPA kit B buffer 所得的酶活性大致相同。
◆各buffer组成
● SDS buffer（2% SDS, 1% Triton X-100, 50 mM HEPES・Na（pH 7.2），150 mM NaCl）
● UltraRIPA kit A buffer（1％ NP-40 Alternative，0.1％ SDS，50 mM Tris-HCl（pH 8.0），150 mM NaCl，0.5％ Sodium Deoxycholate)
● UltraRIPA kit B buffer（成分保密）
● 1% Triton X-100 (1% Triton X-100, 50 mM HEPES・Na（pH 7.2），150 mM NaCl）
◆产品列表
※ 仅供实验研究用，不可用于临床诊断。