胆固醇(Cholesterol)以脂蛋白的微粒形式在体内循环。脂蛋白种类多样,其中HDL(High Density Lipoprotein)可将组织、外周细胞及血液中多余的胆固醇运送到肝脏,防止血液中的胆固醇增加,从而抑制脂质代谢异常及动脉硬化。HDL-胆固醇水平降低常见于冠心病、高脂血症、吸烟、肥胖、糖尿病和肝病患者,同时也是冠心病的主要风险因素之一。
本产品可检测血液(血清/血浆)中的HDL-胆固醇,使用微孔板可快速简便地检测样品中的HDL-胆固醇,且无需离心分离脂蛋白。
前处理液中的亲水基和疏水基可保护样品中的HDL免受胆固醇氧化酶(CO)和胆固醇酯酶(CHE)的影响。此外,HDL以外的脂蛋白,如乳糜微粒(CM)、极低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)(非高密度脂蛋白胆固醇)中的胆固醇会在CO和CHE的作用下分解为脂肪酸和Δ4- 胆甾烯酮,同时生成过氧化氢。而生成的过氧化氢会在过氧化氢酶的作用下被分解为水。
反应试剂发挥作用时,HDL中的胆固醇在CO和CHE的作用下生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下会使N-(3-硫代丙基)-3-甲氧基-5-甲基苯胺(HMMPS)和4-氨基安替比林发生定量氧化缩合,生成一种蓝色色素。通过检测这种蓝色的吸光度,可确定样品中的HDL-胆固醇浓度。
使用本产品分别对人、小鼠、大鼠的2种浓度血清样品进行5次重复检测,确认精确度。
人血清的CV(%)为 0.26-1.4%,小鼠血清的CV(%)为 0.98-2.4%,大鼠血清的CV(%)为 1.7-3.1%,结果良好。
使用本产品在4天内分别对3种不同浓度的人、小鼠、大鼠血清样品进行3次重复检测。
人血清样品的CV(%)为 1.5-3.0%、小鼠血清样品的 CV(%)为 2.7-3.7%,大鼠血清样品的 CV(%)为 2.0-3.2%,所有结果均良好。
使用产品附带的标准品稀释液,按倍数稀释2种浓度的人血清/血浆(EDTA)、小鼠血清/血浆(EDTA)和大鼠血清/血浆(EDTA)后,进行检测并确认线性关系(平行检测两次)。
向人血清/血浆(EDTA)、小鼠血清/血浆(EDTA)和大鼠血清/血浆(EDTA)中添加3种浓度的标准品,进行加标回收测试(平行检测两次)。
使用本产品检测人血清/血浆、小鼠(ICR)血清/血浆样品和大鼠(SD)血清/血浆。
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