CUBIC Trial Kit是一款用于透明化技术CUBIC（Clear, Unobstructed Brain/Body Imaging Cocktails and Computational analysis）的试剂盒。
只需将组织浸入试剂盒包含的溶液中，即可对小鼠大脑和全组织、灵长类的全脑和甲壳类的全组织进行透明化处理和折射率调整。
国立研究开发法人理化学研究所上田泰己教授、洲崎悦生教授
小鼠大脑和全组织，灵长类全脑，鱼类、甲壳类、甲虫等的全组织，骨骼（需进行脱钙处理）
1. ScaleCUBIC-1 Solution——250 mL x 1支
2. ScaleCUBIC-2 Solution——250 mL x 1支
3. Mounting Solution-1——40 mL x 1支
4. Mounting Solution-2——40 mL x 1支
1. 5 mL/15 mL/30 mL/50 mL锥形管（配合样品使用）
3. 用于观察CUBIC透明化样品的荧光显微镜※和推荐物镜※※
请注意，组织透明化实验方案中所用试剂用量、处理时间需根据样品尺寸进行调整。此外，建议在灌注固定后，取出并重新固定样品。
各个步骤中使用的试剂量约为12-15 mL，清洗时建议使用试剂量的5-10倍。
**建议以2 : 8、3：7的比例混合 (RI = ～1.49) 试剂盒中的Mouting Solution 1 和 2 使用
图1．使用Scale CUBIC Solution透明化前后小鼠所有器官的案例
脑组织块的免疫染色案例，详细实验方案请见参考文献（1）
一抗：0.1% (v/v) Triton X-100, 0.5% (w/v) bovine serum albumin, 0.01% (w/v) sodium azide in PBS
二抗：0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1% (w/v) bovine serum albumin, 0.01% (w/v) sodium azide in PBS
***建议以2 : 8、3：7的比例混合 (RI = ～1.49) 试剂盒中的Mouting Solution 1 和 2 使用。
图2．使用CUBIC处理的脑组织块经三维免疫染色后单光子显微镜成像
数据提供：东京海洋大学 海洋生物资源学院 二见邦彦老师
-CUBIC处理后，切片5 μm，可用Mayer’s Hematoxylin染色-
数据提供：浜松医科大学 医学分光应用寄附研究生 绀野在老师，冈崎茂俊老师
图6．使用CUBIC的甲壳类透明化案例（上：螃蟹，下：鼠妇）
图7．观察CUBIC处理后（PI染色）的完整甲壳类（左：螃蟹，右：鼠妇）
数据提供：东京大学大学院 理学系研究科生物科学专业 黑田真也老师
图8．CUBIC处理后（PI染色）的甲虫透明化案例（左：金龟子，中：独角仙，右：锹形虫）
数据提供：Miyawaki, T. et al. : Nat Commun., 27, 11(2020).
（下）使用SDC进行去脂透明化，组织肿胀得到抑制，脑白质也被透明化处理。
（左）使用SDS进行去脂透明化，在箭头部分观察到血管破裂。
（右）使用SDC进行去脂透明化，几乎未观察到血管破裂。
1）E. A. Susaki. et al. : Cell , 157(3), 726(2014).
2）K. Tainaka. et al. : Cell , 159(4), 911(2014).
3）E. A. Susaki. et al. : Nature Protocols , 10, 1709(2015).
4）S. Nojima. et al. : Scientific Reports , 7, 9269 (2017).
5）S. Ohnuma. et al.: Fish Pathology, 52(2), 96(2017).
6）A. Konno and S. Okazaki.: Zoological Letters, 4:13(2018).
7）M Kuroda and S Kuroda (2020). Whole-body clearing of beetles by successive treatment of hydrogen peroxide and CUBIC reagents.
8）Miyawaki, T. et al. : Nat Commun., 27, 11(2020).
◆产品列表
※ 仅供实验研究用，不可用于临床诊断。
